domingo, 1 de diciembre de 2019

Práctica 8: Determinación del fenotipo y genotipo más probable del grupo Rh

Determinación del fenotipo y genotipo más probable del grupo Rh

Objetivo
Investigar el genotipo más probable del sistema Rh enfrentando los hematíes problema a distintos sueros que contienen anticuerpos dirigidos contra los antígenos que componen el sistema Rh.

Fundamento y significado clínico
El estudio del fenotipo es la investigación de antígenos específicos en los hematíes. Para ello son enfrentados a antisueros específicos, aceptando que poseen los correspondientes antígenos en el caso de producirse resultados positivos.
Los fenotipos que se determinan con más frecuencia en la sangre del donante son los Ags E, C, c y e del sistema Rh y los de otros sistemas como Kell, Duffy, Kidd, MNSs y Lewis. Aunque inducen la formación de anticuerpos en baja proporción, estas bolsas son muy útiles para enfermos politransfundidos que puedan presentar Acs frente a estos Ags

Materiales
  • Tubos de hemólisis de 3 mL

  • Tapones

  • Pipetas pasteur

  • Micropipetas de 1000 microlitros

  • Puntas de pipetas desechables


Muestra
  • Sangre anticoagulada grupo A y B


Reactivos
  • Anti-D
  • Anti-E
  • Anti-C
  • Anti-e
  • Anti-c
  • Autocontrol D

Aparataje
  • Centrífuga

Procedimiento 
  1. Hacemos una dilución de los dos tubos de  sangre con 1,9 mL de suero salino fisiológico y 100 microlitros de sangre
  2. Rotulamos los tubos 
  3. Depositamos 4 gotas de los reactivos en cada tubo, cada uno en su correspondiente
  4. Añadimos 4 gotas de la sangre diluida en cada tubo 
  5. Tapamos y agitamos suavemente
  6. Centrifugamos a 1000 r.p.m durante 1 minuto
  7. Resuspendemos el sedimento dando pequeños golpecitos en el fondo del tubo
  8. Observamos la presencia de aglutinación  y apuntamos los datos









Resultados
- Aglutinación: Presencia de grumos rojos oscuros que flotan en el líquido
- Ausencia de algutinación: Los hematíes aparecen en forma de suspensión homogénea de color rojizo

- Sangre del grupo A ( ccee k+):
- D: negativo
- E: negativo
- C: negativo
- e: negativo
- c: positivo



- Sangre del grupo B(CcEc k-):
- D: positivo
- E: positivo
- C: negativo
- e: negativo
- c: positivo