Tinciones de Wright y May-Grünwald
Objetivo
El objetivo de esta práctica es preparar las distintas tinciones para las extensiones sanguíneas anteriormente preparadas, y ver sus diferencias
Fundamento
La tinción de May-Grünwald está formada por azul de metileno y sus derivados oxidades, componentes básicos y eosina, que es un colorante ácido. Los colorantes básicos se unen a los componentes ácidos de las células (ácidos nucleicos, gránulos en basófilos, y proteínas ácidas que se tiñen de color púrpura).
La eosina se une a la hemoglobina, a los componente básicos de las células y a los gránulos de los eosinófilos.
El contraste entre el azul de metileno, sus derivados y la eosina da un azul más o menos intenson y una mayor o menor coloración.
La tinción de Wright es del mismo tipo que la de May-grünwald, ya que las dos son de tipo Romanowsky.
Materiales
- Cubetas para tinción y paralelas
- Pipeta graduada y auxiliar de pipeteo
- Vaso de precipitado
- Pipetas pasteur
Muestra
- Preparaciones de extensiones sanguíneas
Reactivos
- Agua destilada
- Suero salino fisiológico
- Colorante May-grünwalg
- Colorante de Wright
- Giemsa
Aparataje
- Microscopio
Procedimiento
- Tinción de May-Grünwald
- Preparamos las cubetas con las paralelas y añadimos agua a la cubeta, para que a la hora de lavarlas sea más fácil quitarles el colorante
- A continuación preparamos la dilución 1/10 de giemsa. Nuestro grupo preparó 18 mL de agua tamponada y 2 mL de colorante giemsa.
- Colocamos los portaobjetos que tienen las preparaciones sobre las parelelas y comenzamos la tinción
- Cubrimos la preparación con 2 mL de colorante de May-Grünwald y la dejamos actuar durante 3 minutos
- Después se vierte el colorante inclinando el porta y sin lavar se cubre con 2 mL de giemsa
- A los 15 minutos, lavamos con agua en abundancia
- Dejamos secar al aire
- Tinción de Wright
- Colocamos el porta sobre las paralelas y comenzamos la tinción
- La preparación se cubre con 1 mL de colorante de Wright, que se deja actuar durante 5 minutos
- A continuación, y sin lavar, añadimos 1 mL de agua tamponada soplando ligeramente con la pipeta para conseguir una mezcla homogénea
- Después de 5 minutos, vertimos el colorante y lavamos con abundante agua destilada
- Dejamos secar al aire
Visualización
Para la visualización utilizaremos el microscopio y trabajaremos con todos los objetivos.
No hay comentarios:
Publicar un comentario