Práctica 7: Determinación de los grupos sanguíneos ABO/Rh combinado con la prueba inversa o grupo sérico

Determinación de los grupos sanguíneos ABO/Rh combinado con la prueba inversa o grupo sérico

Objetivo

El objetivo de la práctica es determinar el grupo sanguíneo en las tarjetas DiaClon ABO/D + Reverse Grouping

Fundamento

Los antisueros anti-A y anti-B son necesarios, para demostrar la presencia o ausencia de los antígenos A/B en hematíes humanos. 

La determinación de los grupos sanguíneos ABO requieren la realización de una contraprueba serológica o grupo inverso con plasma o suero para confirmar los resultados obtenidos en la prueba hemática. 

Para la contraprueba serológica se utilizan hematíes con una especialidad antígeno-ABO conocida, para detectar la presencia o ausencia en el plasma o suero de las isoaglutininas anti-A y anti-B. Una discrepancia entre la determinación del antígeno y la contraprueba exigen ampliar el estudio.

La tarjeta ID-Card DiaClon ABO/D+ Reverse Grouping permite en una ID-tarjeta determinar el grupo hemática y el grupo sérico para ABO, así como la determinación del antígeno RhD.

Materiales

• Micropipetas automáticas

• Puntas de pipeta desechables

• Tubos de hemólisis

Muestras

• Sangre anticoagulada con EDTA

• Soporte para las tarjetas

Reactivos

• La tarjeta contiene : Anti-A, anti-B y anti-D.
• El microtubo ctl es el control negativo
• Dos microtubos con gel neutro que sirven para la prueba inversa del grupo sanguíneo con hematíes A1 y B

• Suero salino fisiológico

• Hematíes test A1 y B

Aparataje

• ID-Centrífuga

Procedimiento 

- Preparación de la muestra de sangre

• Preparación de la determinación ABO/D

1. Pipetear 0,5 mL de suero salino fisiológico en un tubo limpio
2. Agrega 50 microlitros de sangre total 
3. Mezclar cuidadosamente

• Suero o plasma para el sérico o contraprueba

1. El plasma deberá estar conservado en el frigorífico

- Prueba

1. Identificamos la tarjeta ID-Card con el número de mesa
2. Vamos retirando la lámina de sellado sólo de los microtubos que se vayan a utilizar manteniendo la ID-Tarjeta en posición vertical
3. Pipeteamos 50 microlitros de ID-DiaCell A1 en el microtubo 5
4. Pipeteamos 50 microlitros de ID-DiaCell B- en el microtubo 6
5. Agregamos 50 microlitros de suero en los microtubos 5 y 6 e incubamos 10 minutos a Tª ambiente
6. Agregamos 10 microlitros de suspensión de hematíes del paciente en los microtubos del 1 al 4
7. Centrifugamos la tarjeta durante 10 minutos en la ID-Centrífuga

Resultados

- Nos dio positivo para el grupo AB+, pero la sangre que utilizamos realmente era A -. En cuanto al grupo sérico, uno de los microtubos tiene a los hematíes depositados en la membrana y en otro han precipitado